研究报告/Research Report

利用 CRISPR/Cas9 技术创建 OsGPRP 家族基因突变体  

王鑫1 , 刘丹阳1 , 欧阳解秀 1,2 , 彭辉1 , 李绍波1 , 阎新1*
1 南昌大学生命科学学院, 南昌, 330031; 2 南昌大学医学实验教学中心, 南昌, 330031
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2018 年, 第 16 卷, 第 16 篇   
收稿日期: 2017年12月26日    接受日期: 2018年01月18日    发表日期: 2018年08月16日
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推荐引用:

Wang X., Liu D.Y., Ouyang J.X., Peng H., Li S.B., and Yan X., 2018, Mutants for OsGPRPs constructed based on
CRISPR
/Cas9 technology, Fenzi Zhiwu Yuzhong (Molecular Plant Breeding), 16(15): 4943-4949 (王鑫, 刘丹阳, 欧阳解秀, 彭辉, 李绍波, 阎新, 2018, 利用 CRISPR/Cas9 技术创建 OsGPRP 家族基因突变体, 分子植物育种, 16(15): 4943-4949)

摘要

本研究利用 CRISPR/Cas9 技术对水稻 OsGPRP 家族基因进行敲除,在 3 个水稻 OsGPRP 基因的第一个外显子 PAM 序列区域各设计一个靶位点,并将 3 个靶位点的 sgRNA 进行串连,成功构建了 3 OsGPRP基因同时敲除的 CRISPR/Cas9 载体;采用根癌农杆菌介导的遗传转化获得了 60 T0 CRISPR 转基因植株;通过 PCR 扩增和测序分析,我们获得了 2 种不同类型的 OsGPRP3 单基因突变材料;6 种不同类型的OsGPRP2/OsGPRP3 两基因突变植株;1 种类型的 OsGPRP1/OsGPRP3 两基因纯合突变植株和 4 种不同类型的 OsGPRP1/OsGPRP2/OsGPRP3 三基因突变材料,为进一步研究 OsGPRP 家族基因的生物学功能及其相互关系提供遗传材料。

 

关键词
水稻; OsGPRP 家族基因; CRISPR/Cas9; 载体构建

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《分子植物育种》印刷版
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